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中國海洋大學(xué)團(tuán)隊成功研發(fā)我國首款虹鱒SNP育種芯片——“虹芯1號” |
http://m.gerecailiao.cn 2025年3月24日 來源:華禹教育網(wǎng) |
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近日,中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院高勤峰教授團(tuán)隊,聯(lián)合山東海洋集團(tuán)有限公司和華智生物技術(shù)有限公司,利用cGPS靶向測序分型技術(shù)研發(fā)了我國首款虹鱒SNP育種芯片——“虹芯1號”(圖1)。這是我國目前虹鱒育種領(lǐng)域唯一擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的行業(yè)專用芯片,意味著國產(chǎn)虹鱒育種芯片自主攻關(guān)實現(xiàn)重要突破,為虹鱒精準(zhǔn)育種與產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展注入“芯”動力。

圖1 虹鱒50K cGPS液相育種芯片“虹芯1號”
虹鱒(Oncorhynchus mykiss)隸屬于鮭科,太平洋鮭屬,是全球重要的養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚類(圖2)。我國自1959年從朝鮮引入虹鱒以來,其養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)逐步興起,并在60余年間迅速發(fā)展,目前養(yǎng)殖地區(qū)遍布12個省份,年產(chǎn)量約為4萬噸。近年來,我國工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖設(shè)施和大型鋼結(jié)構(gòu)深遠(yuǎn)海養(yǎng)殖網(wǎng)箱的設(shè)計與建造取得關(guān)鍵技術(shù)突破,為海水養(yǎng)殖虹鱒產(chǎn)業(yè)規(guī);l(fā)展提供了裝備基礎(chǔ)。然而,目前我國虹鱒養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的優(yōu)良種質(zhì)資源嚴(yán)重依賴美國、加拿大、丹麥和挪威等西方國家,其苗種均以“全雌三倍體”的形式出售,種源被嚴(yán)格控制,制約著我國鮭鱒魚類海水養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的規(guī);l(fā)展。

圖2 虹鱒(Oncorhynchus mykiss)
利用高效的現(xiàn)代分子育種技術(shù)和工具,快速培育優(yōu)質(zhì)的虹鱒苗種成為突破我國鮭鱒魚類良種匱乏“卡脖子”難題的關(guān)鍵。基因組選擇育種是一種利用覆蓋全基因組的高密度標(biāo)記進(jìn)行遺傳選育的新方法,具有周期短、準(zhǔn)確性高等優(yōu)勢,目前已被應(yīng)用至許多重要水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)物種的良種選育研究工作,其選育效果顯著優(yōu)于傳統(tǒng)的群體選育和家系選育技術(shù)。鮭鱒魚類由于經(jīng)歷了特異性的第四次全基因組復(fù)制事件,導(dǎo)致其基因組大小約為普通硬骨魚類的2倍至4倍,由此產(chǎn)生的高昂測序費用和巨大計算資源消耗,成為鮭鱒魚類基因組選擇育種工作廣泛開展的重要限制因素。
育種芯片是重要的現(xiàn)代分子育種工具,可對種質(zhì)資源海量SNP位點進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的分型檢測,并且具有較低的單位檢測成本。世界第一款虹鱒育種芯片由USDA美國農(nóng)業(yè)部于2014年開發(fā),共包含57,501個SNP位點,然而由于當(dāng)時的技術(shù)限制,導(dǎo)致芯片中含有約20,000個SNP位點冗余,影響了其分型效率。2021年,法國國家農(nóng)業(yè)研究院發(fā)布了世界第二款虹鱒SNP育種芯片(667K),其位點的遺傳信息來自于美國農(nóng)業(yè)部和法國國家農(nóng)業(yè)研究院的公共數(shù)據(jù)庫以及俄羅斯和加拿大的虹鱒繁育和野生群體。由于芯片位點密度過高且針對于歐美的虹鱒野生和繁育群體研發(fā),對亞洲虹鱒繁育群體的適用性較差,限制了其在我國虹鱒科學(xué)研究的應(yīng)用。
“虹芯1號”液相育種芯片同時兼顧了國內(nèi)外虹鱒繁育和野生群體的遺傳信息,共有51,508個高質(zhì)量SNP位點,其中超過67%的位點來源于國內(nèi)虹鱒群體。其中,國內(nèi)虹鱒繁育群體來自山東濰坊、遼寧本溪、甘肅臨夏、四川攀枝花和新疆博樂等地區(qū),國外虹鱒的遺傳信息則由美國、加拿大、挪威、丹麥、波蘭和西班牙等國家主流繁育和野生群體組成!昂缧1號”液相芯片應(yīng)用場景豐富,可同時滿足國內(nèi)外虹鱒野生和繁育群體的種質(zhì)資源鑒定、遺傳多樣性評估、全基因組選擇育種、全基因組關(guān)聯(lián)分析和遺傳圖譜構(gòu)建等多方面研究工作的需求,有助于其重要經(jīng)濟(jì)性狀遺傳基礎(chǔ)的解析與優(yōu)異基因資源的挖掘。
優(yōu)勢一:性狀關(guān)聯(lián)位點豐富
“虹芯1號”SNP背景位點基于國內(nèi)5個地區(qū)的虹鱒繁育群體以及美國、加拿大、挪威、丹麥、波蘭和西班牙等國家的虹鱒野生與繁育群體的495份高深度全基因組重測序數(shù)據(jù)構(gòu)建完成。此外,“虹芯1號”還涵蓋了國內(nèi)外科研院所篩選獲得的虹鱒重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的SNP位點,主要包括:本研發(fā)團(tuán)隊基于基因組選擇育種、群體遺傳分化研究和全基因組關(guān)聯(lián)分析篩選的虹鱒海水生長速度、肌肉品質(zhì)和高鹽耐受性等關(guān)鍵經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的1153個SNP位點;國外研究機(jī)構(gòu)鑒定得到的虹鱒低氧耐受,高溫耐受、抗柱狀黃桿菌等性狀相關(guān)的593個高質(zhì)量SNP位點。同美國農(nóng)業(yè)部以及法國國家農(nóng)業(yè)研究院開發(fā)的虹鱒育種芯片相比,“虹芯1號”在國內(nèi)虹鱒繁育群體研究的適用性更強(qiáng),尤其針對海水環(huán)境下虹鱒的生長速度和肌肉品質(zhì),可推動我國海水養(yǎng)殖虹鱒良種的遺傳選育工作進(jìn)程。
優(yōu)勢二:通用性強(qiáng)、成本低、效率高
研究團(tuán)隊前期基于“虹芯1號”完成了18個虹鱒群體的遺傳結(jié)構(gòu)分析,其與全基因組重測序數(shù)據(jù)分析結(jié)果高度一致(圖3-圖5)。此外,同傳統(tǒng)重測序方法相比,“虹芯1號”操作便捷,無需經(jīng)過復(fù)雜的數(shù)據(jù)分析流程,可在一周之內(nèi)快速完成SNP分型,且價格僅為重測序的四分之一左右,大幅提高了檢測效率,降低了成本!昂缧1號”液相芯片靈活性高,可塑性強(qiáng),根據(jù)研究需要,即可在原有芯片基礎(chǔ)上隨時添加SNP新位點,無需重新定制。

圖3 “虹芯1號”與重測序數(shù)據(jù)的PCA主成分分群效果對比

圖4 “虹芯1號”與重測序數(shù)據(jù)的系統(tǒng)發(fā)生樹對比

圖5 “虹芯1號”與重測序數(shù)據(jù)的STRUCTURE結(jié)果對比
優(yōu)勢三:位點多態(tài)性高、基因組分布均勻
“虹芯1號”的51,508個SNP位點經(jīng)過嚴(yán)格的雜合率、最小等位基因頻率和位點缺失率等參數(shù)篩選,虹鱒基因組的平均覆蓋率為99.73%,平均間距為43Kb (圖6)。相比傳統(tǒng)固相芯片,液相芯片可以捕獲更多mSNP(多核苷酸多態(tài))標(biāo)記,具有填充位點分布均勻、多樣性信息豐富、分型準(zhǔn)確的突出優(yōu)勢。

圖6 “虹芯1號”SNP位點的染色體分布以及注釋信息統(tǒng)計
通訊員:田源
附:研發(fā)團(tuán)隊簡介
研發(fā)團(tuán)隊為深遠(yuǎn)海養(yǎng)殖鮭鱒魚類遺傳和種質(zhì)研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化團(tuán)隊,團(tuán)隊首席為中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院高勤峰教授,核心技術(shù)成員包括中國海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院田源副教授,山東海洋集團(tuán)有限公司孟祥科高級工程師等,以及水產(chǎn)學(xué)院研究生何景鴻、黃銘、曾祥兵等。該團(tuán)隊主要從事虹鱒種質(zhì)資源收集與保存、基因組圖譜的構(gòu)建與關(guān)鍵經(jīng)濟(jì)性狀遺傳學(xué)基礎(chǔ)和分子機(jī)制解析等方面研究工作。
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